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rf受哪些实验条件的影响

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关于大学有机实验薄层色谱Rf≈1的原因希望能有大佬告诉我实验错在哪 ...

说明纸层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质?列出纸层析一般操作步骤和影响Rf值的因素: 原理
1.蛋白质的水解
蛋白质可以用酸、碱或酶如胃蛋白酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶水解成最终产物氨基酸。实验室中常使用酸解法水解蛋白质。当在6 mo叭。盐酸溶液中将蛋白质在110t加热大约20 h,肽键断裂,此时蛋白质完全分解为氨基酸。
酸法水解蛋白质的优点是在水解过程中不发生外消旋作用,所得到的氨基酸均为L一氨基酸。大多数氨基酸在煮沸酸中是稳定的,但色氨酸则完全被破坏。丝氨酸和苏氨酸在酸解过程中或多或少地也有破坏。色氨酸的水解产物已知是一种棕黑色的物质——腐黑质,因此,用酸法水解蛋白质得到的水解液为棕黑色的。
2.纸层析法分离氨基酸
纸层析是以滤纸作为支持物的分配层析法。它利用不同物质在同一推动剂中具有不同的分配系数,经层析而达到分离的目的。在一定条件下,一种物质在某溶剂系统中的分配系数是一个常数,若以K表示分配系数

层析溶剂(又称推动剂),是选用有机溶剂和水组成的。滤纸纤维素与水有较强的亲和力(纤维素分子的葡萄糖基上的-OH基与水通过氢键相作用)能吸附很多水分,一般达滤纸重的22%左右(其中约有6%的水与纤维素结合成复合物),由于这部分水扩散作用降低形成固定相;而推动剂中的有机溶剂与滤纸的亲和力很弱,可在滤纸的毛细管中自由流动,形成流动相。层析时,点有样品的滤纸一端浸入推动剂中,有机溶剂连续不断地通过点有样品的原点处,使其上的溶质依据本身的分配系数在两相间进行分配。随着有机溶剂不断向前移动,溶质被携带到新的无溶质区并继续在两相间发生可逆的重新分配,同时溶质离开原点不断向前移动,溶质中各组分的分配系数不同,前进中出现了移动速率差异,通过一定时间的层析,不同组分便实现了分离。物质的移动速率以Rf值表示:

各种化合物在恒定条件下,层析后都有其一定的Rf值,借此可以达到定性、鉴别的目的。
溶质的结构与极性、溶剂系统的物质组成与比例、pH值、滤纸的质地以及层析的温度、时间等都会影响Rf值。
仪器试剂和材料
1.仪器
(1)干燥箱
(2)水浴锅
(3)安培瓶
(4)层析缸
(5)吹风机
(6)喷雾器
2.试剂
(1)6mol/L HCl
(2)标准氨基酸(lml/mL):称取亮氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、缬氨酸、组氨酸各lmg,分别溶于lml 0.01mol/L的HCl溶液中,保存于冰箱
(3)展层剂:正丁醇:88%甲酸:水=15:3:2(V/V)
(4)0.5%的茚三酮丙酮溶液
(5)10%异丙醇溶液
3.材料
(1)层析滤纸(10cm × 10cm),普通滤纸(21cm × 21cm)
(2)毛细管、培养皿、镊子
操作步骤
1.蛋白质的水解
称取0.Zg酵母粉,放进一个小安培瓶中,向瓶中加入l ml 6mol/L的盐酸,于喷灯火焰上封口。将安培瓶放入干燥箱内,在110℃下水解20 h后,把安培瓶内的水解液倒进蒸发皿内,将蒸发皿放于沸水浴上加热以除去水解液中的盐酸。将水解液蒸干,溶解于0.5—l ml 10%的异丙醇中。
2.纸层析法分离氨基酸
取 1张 10 × 10cm的层析滤纸放在普遍滤纸上,用直尺和铅笔在距滤纸底边2 cm处划一条平行于底边的很轻的直线做为基线。沿直线以一定的间隔做标记以指示标准氨基酸和蛋白质水解液的加样位置。用毛细管吸少量氨基酸样品点于标记的位置上。点样时,毛细管口应与滤纸轻轻接触,样点直径一般控制在0.3cm之内。用吹风机稍加吹干后再点下一次,重复3次,每次的样品点应完全重合。加样完毕后,将滤纸卷成圆筒状,使基线吻合,两边不搭接,用针和线将纸两边缝合。将点好样品的滤纸移入层析缸中(层析缸内事先加入一个注人40ml展层剂的直径为10cm的培养皿,使液层厚度为1cm左右,盖上层析缸的盖子20min,以保证罩内有一定蒸汽压),采用上行法进行展层。当溶剂前沿上升到距纸上端Icm时,取出滤纸,立即用铅笔记下溶剂前沿的位置,剪断缝线,用吹风机吹干滤纸上的溶剂。之后用前三酮丙酮溶液均匀地喷洒在滤纸有效面上,切勿喷得过多致使斑点扩散。然后将滤纸放入烘箱,于80℃下显色5min后取出。
结果处理
用铅笔轻轻描出显色斑点的形状,并用一直尺度量每一显色斑点中心与原点之间的距离和原点到溶剂前沿的距离,计算各色斑的Rf值,与标准氨基酸的Rf值对照,确定水解液中含有哪些氨基酸。
注意事项
1.点样时要避免手指或唾液等污染滤纸有效面(即展层时样品可能达到的部分)。
2.点样斑点不能太大(直径应小于0.3 cm),防止层析后氨基酸斑点过度扩散和重叠,且吹风温度不宜过高,否则斑点变黄。
3.展层开始时切勿使样品点浸入溶剂中。
4.作为展层剂的正丁醇要重新蒸馏,甲酸须用分析纯的。且展层剂要临用前配制,以免发生酯化,影响层析结果。
5.如果样品中溶质种类较多,且某些溶质在某一溶剂系统中的Rf值十分接近时,单向层析分离效果不佳,则可采用双向层析,即将样品点在一方形滤纸的角上,先用一种溶剂系统展层。滤纸取出干燥后,再将滤纸转90度角,用另一溶剂系统展层。所得图谱分别与这两种溶剂系统中作的标准物质层析图谱对比,即可对混合物样品中各成分进行鉴定。
参考文献
文树基。主编基础生物化学实验指导.西安:陕西科学技术出版社,1994

影响只Rf值的主要因素

1 层析液放入适量,标准是保持层析过程既不挥发完(因此层析过程最好盖住),也不没刻线。
2 层析时间不应太长,否则使一种液体爬到最高处就不能侧其Rf,最好实验前做一小测试判断液体爬到最高处的时间。
3 层析完后尽快用铅笔画出区域(为圆形),防止颜色褪掉。等测量时,测量刻线到圆心的距离,按照公式即可。

影响薄层色谱rf值的因素有哪些: 1)【展开剂】是影响色谱分离度的重要因素。
一般来说,展开剂的极性越大,对特定化合物的洗脱能力也越大。
一般常用展开剂按照极性从小到大的顺序排列大概为:
石油醚<己烷<甲苯<苯<氯仿<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇<水<乙酸。

2)一个化合物在吸附剂上移动的距离与展开剂在吸附剂上移动的距离的比值称为该化合物比移值Rf。

偶氮苯及其衍生物的分离鉴定实验中,展开剂中增加四氯化碳的量,Rf值会怎样变:

两者的Rf值都会减小。

偶氮苯及其衍生物的分离鉴定实验中,展开剂中增加四氯化碳的量,Rf值会减少。ccl4的量增加使偶氮苯的Rf值增大,CCl4为非极性溶剂,而偶氮苯的极性小于对二甲氨基偶氮苯,所以增加CCl4的量使偶氮苯的Rf值增大。

取芦丁和槲皮素各数毫克,分别置于两支小试管中,加 0.5毫升乙醇溶解,再加 α-萘酚数毫克,振摇使之溶解,然后沿试管壁加浓硫酸约 0.5毫升,静置,观察,两液层界面变化,呈紫红色环者示分子中含糖结构。

扩展资料:

薄层色谱法(TLC),系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于跟踪反应进程。

实验原理:薄层色谱(薄层层析)是在柱色谱和纸色 谱的基础上发展起来的一种微量、快速而又操 作简便的色谱法。与柱色谱与纸色谱相比,薄 层色谱具有分离效率高、灵敏度高、应用面广 以及层析后可用各种方法显色等优点。 薄层色谱法在有机化学中的主要用途为: 

1.确证两个化合物是否相同;

2.测定混合物 中组分数目;

3.监控合成反应的进程;

4.监控柱层析分离的有效程度。 薄层色谱可用着定性分析外,还可与比色 法相配合起来作定量分析。

参考资料:薄层色谱法-百度百科

在薄层层析实验中,在一定条件下为什么可利用Rf值来鉴定化合物:

在特定的展开剂中,Rf值几乎可以认为是物质的特性之一。取标准品和样品,如果在两个以上的展开剂系统中,样品都有和标准品相同Rf的点,基本可以确定样品中含有标准品。

如果样品在多种展开剂中,都显示只有一个点,而这个点的Rf和标准品(或者报道的标准品的)Rf总是相同,那么此样品就是标准品所含物质。

将吸附剂、载体或其他活性物质均匀涂铺在平面板(如玻璃板、塑料片、金属片等)上,形成薄层(常用厚度为0.25毫米左右)后,在此薄层上进行层析分离的分析方法。

扩展资料:

在薄层、溶剂、温度等各项实验条件恒定的情况下,各物质的Rf值是不变的,它不随溶剂移动距离的改变而变化。Rf与分配系数K的关系:

Rf=1/(1+αK),α是由薄层性质决定的一个常数。由此可见,K值愈大,溶质分配于固定相的趋势愈大,而Rf值愈小;反之,K值愈小,则分配于流动相的趋势愈大,Rf值是定性分析的重要指标。

在流动相、固定相和展开条件固定时,Rf值是组分的特性,可用以进行定性鉴别。实用时也常将样品与已知纯物质同时展开,比较二者移动情况,进行定性分析。

参考资料来源:百度百科--薄层层析

类风湿性关节炎需做哪些实验室检查?:

(1)滑液检查。外观呈混浊的草黄色浆液,黏稠度降低,黏蛋白凝固不全,可见到类风湿性关节炎细胞。对类风湿的诊断提供重要参考。

(2)血沉。即红细胞沉降率(ESR),可作为判断炎症活动度的可靠指标,其升降与类风湿的活动度相一致,也可作为判定疗效及诊断的指标。

正常值:儿童每小时< 10mm;成年男性每小时0 ~ 15mm;成年女性每小时0 ~ 20mm;类风湿轻度活动时每小时20 ~ 40mm;中度活动时每小时40 ~ 80mm;高度活动时每小时> 80mm。类风湿患者的血沉增快可不受抗风湿药治疗的影响,这一点可与风湿性关节炎(治疗后血沉迅速下降)相区别。关节肿痛明显好转,炎症现象已消退,血沉仍持续增快或不下降时,表明类风湿性关节炎随时有可能复发或恶化,但也有血沉始终正常而病情复发或恶化者。

血沉增快提示组织的损害,可由多种原因引起,虽无特异性,但在疾病的鉴别与诊断及疾病活动度判断方面有一定价值。若患者表现为关节痛,临床症状很少,血沉尤其是多次检查正常者,则很难诊断为类风湿性关节炎。

(3)抗链球菌溶血素“O”。简称抗“O”或ASO。正常值约250 单位~ 500 单位,此值因年龄、季节、气候、链球菌流行情况,尤其地区而有所差别。有人分析,类风湿患者中抗“O”升高占30%。菲丝等将类风湿的ASO 分为四种血清类型。

①抗链球菌溶血素型:ASO 升高,类风湿因子阴性时,见于风湿热。

②凝集型:ASO 正常,类风湿因子阳性时,表示预后不良。

③混合型:ASO 升高,类风湿因子阳性,见于类风湿。

④正常型:ASO 正常,类风湿因子阴性,可除外类风湿。

(4)类风湿因子(RF)。类风湿因子是一种身体内产生的抗IgG 的免疫球蛋白,主要由滑膜的浆细胞合成并分泌入滑液和血液中,另外,脾、淋巴结和类风湿性皮下结节的浆细胞也可产生。

检查类风湿因子的常用方法有两种:乳胶法,最常用,类风湿患者约有70% ~ 85% 出现阳性,15% ~ 30% 为阴性;致敏羊血球凝集试验(简称SSCA 或SCAT),此法较敏感,1 ∶ 64 以上为阳性,1 ∶ 160 以上有意义,类风湿患者约有70% ~ 100% 出现阳性,小儿病程久者为27%。

在评价类风湿因子的临床意义时,应注意以下几点。

①典型和肯定的类风湿患者的RF 阳性率仅在80% 左右,不典型和初患病例的阳性率较低。

② RF 阳性也可出现于其他结缔组织疾病,其他慢性炎症及恶性肿瘤,如风湿热、系统性红斑狼疮、皮肌炎、牛皮癣、结节病、慢性肝炎、肝硬化、结核、慢性支气管炎、亚急性细菌性心内膜炎、梅毒、麻风、矽肺、膀胱肿瘤、白血病等。

③正常人群的类风湿因子阳性率在5% 左右,老年人的阳性率可达20% 左右。

④类风湿因子多见于具有关节外病变的类风湿患者,如皮下结节、血管炎、心肺损害等。

⑤类风湿因子的滴度越高,出现越早,则病变越可能向严重方向发展,故RF 也可作为判断预后的一个指标。

由此看来,把RF 阳性作为诊断类风湿性关节炎的一个绝对证据是不对的,而有些人看到RF 阳性的结果时忧心忡忡,以为自己患了类风湿,这显然也是不正确的。这一切都是“类风湿因子”这一名称造成的误会。我们知道,类风湿因子是一种抗IgG 免疫球蛋白,任何能引起抗IgG 的免疫球蛋白增高的疾病,都可以造成类风湿因子阳性,并非只见于类风湿患者。

(5)C- 反应蛋白。亦称丙种反应蛋白,简称CRP。正常人为阴性,类风湿早期和急性风湿时,血清中可达33mg,其阳性率为80% ~ 90%。CRP 的临床意义与血沉相同,是反映炎症的良好指标。

类风湿活动期明显增多,与血沉增快相平行,但比血沉增快出现得早,消失也快。CRP 含量越多,表示病变活动度愈高。炎症恢复期,若CRP 阳性,预示仍有突然出现临床症状的可能。

CRP 阳性,也可见于肺炎、肾炎、恶性肿瘤及急性感染、外伤、组织坏死、心肌梗死、肝炎、菌痢、结核、疫苗接种之后等。但病毒感染时通常为阴性,故临床上可作为鉴别细菌感染和病毒感染的指标。

(6)人类组织相容性抗原(HLA)。测定人类组织相容性抗原主要用于类风湿与强直性脊柱炎的鉴别诊断。类风湿患者HLA—B27 为阴性,而强直性脊柱炎患者90% ~ 100% 为阳性。健康人阳性率约为5% ~ 9%。

关于大学有机实验薄层色谱Rf≈1的原因: Rf=1,说明该组分与展开剂极好的溶解在一起,速度与溶剂几乎是同步。

大学物理实验 温度传感器研究 答案 用叠代法计算Rs,Rf,先赋值给Rf会怎样: MISS XU,上周您的实验报告已经交了吧?
您在上边怎么写的?
您怎么写的就怎么回复我吧,我这次是这个实验。还没完成。

手机CE认证RF主要测什么?测试频段有哪些?: 2013-01-07 09:36主要 有1、手机CE认证测试标准:
CTIA,TestPlanforMobileStationOvertheairPerformance
CTIA,手机空中特性测试
2、手机CE认证测试项目:Freespaceconfiguration,Greatcirclecutmethod
静区均匀度,大环法TRP(TotalRadiatedPower)
总辐射功率PeakEIRP(peakeffectiveisotropicradiatedpower)
峰值有效等方向辐射功率Directivity(differencebetweenpeakEIRPandTRP)
方向(EIRP和TRP之间的差异)Efficiency(differencebetweenTRPandantennaportinputpower)
效率(TRP和天线输入功率之间的差异)NHPRP(Near-horizonpartialradiatedpower)
近场辐射功率TIS(Totalisotropicsensitivity)
总全向敏感度EIS(effectiveisotropicsensitivity)
有效等方向敏感度NHPIS(near-horizonpartialisotropicsensitivity

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